5、第二种方法：
（1）吸去前低渗液，立即加入甲醇：冰醋酸（3：1）固定液固定20-30分钟
（2）水洗：将固定好的材料用蒸馏水洗三次，除去材料中的固定液
（3）酶解去壁：在小瓶内加入混合酶液（酶液量以浸过材料为合适），在25℃下酶解30-60分钟
（4）后低渗：同4、（2），但是，可适当延长时间至1-1.5小时。
6、经过上述两种方法处理的材料,可用两种方法制备染色体标本
1）、第一种方法,涂片法:
（1）固定：将后低渗好的材料，直接用甲醇：冰醋酸（3：1）固定液固定30分钟以上
（2）涂片：将材料放在预先用蒸馏水浸泡并冷冻的清洁载玻片上，加1滴固定液，然后用镊子迅速将材料夹碎涂布，并去掉大块组织残渣
（3）火焰干燥：立即将载玻片在酒精灯火焰上微微加热烤干
（4）染色：经干燥的玻片标本，用Giemsa染色液染色30分钟，然后用自来水细流冲洗，甩干水珠空气干燥。
2）、第二种方法，悬液法：
（1）制备细胞悬液：倒去双蒸水，用镊子立即将材料夹碎形成细胞悬液
（2）固定：向细胞中加入新配制的甲醇：冰醋酸（3：1）固定液1-2ml，使成细胞悬液
（3）去沉淀：静置片刻使大块组织沉淀，然后取上层细胞悬液于另一个小瓶中。
（4）去上清夜：将上层细胞悬液静置30分钟左右，即可见细胞沉淀，用吸管轻轻吸去上清夜，留约0.5ml左右细胞悬液置备标本
(5)标本制备:在一张经过充分洗净脱脂,并预先在蒸馏水中冷冻的清洁载玻片上,用吸管滴2-3滴细胞悬液,立即将载玻片一端抬起,并轻轻吹气，使细胞迅速分散，然后在酒精灯火焰上微微加热烤干。
（6）染色：同涂片法（4）
7、在显微镜下寻找典型的中期染色体，注意观察中期染色体的长臂、短臂和着丝粒位置，并尽可能找到具随体染色体。
实验步骤流程如下：
六、注意事项：
1、预处理是很重要的一个步骤，必要时可将预处理药品直接加到培养皿内进行活体处理3—4小时，以便获得更多的中期分裂相
植物染色体，植物染色体标本