一、实验目的：
1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法
2、了解中期染色体的形态结构
二、实验原理：
植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等（1979，1982）提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗法，并在多种植物上得到广泛应用，成为当前植物染色体研究中的重要方法。
三、实验用品：
（一）器材：
显微镜；温箱；冰箱；重蒸水；眼科镊子；刀片；牙签；载玻片；试剂瓶；三角瓶；量筒；酒精灯；青霉素小瓶
（二）药品：
1、0.2%秋水仙素溶液
2、Giemsa原液:取Giemsa粉0.5g加入33ml优质并三醇于研钵中,充分研磨1小时,然后在56℃温箱中保温2小时,再加入33ml甲醇(GR或AR级),混匀后装入棕色瓶中保存备用,贮存时间越久越好.
3、甲醇（AR级以上）
4、冰醋酸（AR级以上）
5、0.075mol/L氯化钾:称取氯化钾5.592g,置于容量瓶内加蒸馏水至1000ml
6、磷酸缓冲液：
A液：0.067mol/L磷酸氢二钾
B液: 0.067mol/L磷酸氢二钠
用时将13mlA液和87mlB液混匀即得pH7.6的PBS液
7、Giemsa染色液（染色前临时配制）：100mlPBS液+3-5mlGiemsa原液
8、混合酶液：称取纤维素酶，果胶酶各0.5g,加入20ml蒸馏水即为2.5%混合酶液,冰箱内冰冻保存
四、实验材料:
大麦或玉米种子
五、方法步骤：
1、材料培养：将玉米或大麦的种子充分浸种后，摆在铺有滤纸的培养皿内，在25℃温箱发芽培养
2、预处理：待根长至0.5-1cm时,切取根尖立即放入盛有1ml0.2%秋水仙素的小瓶中预处理2-3小时
3、前低渗：切取分裂旺盛的部分根尖（1mm），放入0.075mol/L氯化钾低渗液中，在25℃条件下处理30分钟。以下可分两种方法进行处理
4、第一种方法：
（1）、酶解去壁：吸去氯化钾溶液，加入混合酶液（2ml滴管5滴左右），在25℃下处理1-2小时。
（2）、后低渗：吸去酶液，慢慢加入(25±0.5) ℃的双蒸水,轻轻洗一次,然后在双蒸